Monoclonal antibody‐gold silver staining dot assay for the detection of antigenaemia in candidosis: MAK‐Gold‐Silber‐Dot‐Reaktion zum Antigenämie‐Nachweis bei Candidose

Summary. A monoclonal antibody (Mab), designated 5B2, reacting with cell wall mannoproteins of Candida albicans has been purified and coupled to colloidal gold. The ability of the gold conjugated Mab to detect C. albicans antigens in serum during infection has been assessed in a dot immunobinding assay involving an immunogold silver enhancement procedure (GSS). A double blind study was made with sera from 140 guinea pigs, including 40 control animals and 100 infected intravenously with C. albicans. Sera from infected animals were collected either 2 days (4 animals), 15 days (9 animals), or 21 days (87 animals) after inoculation. The overall sensitivity, specificity and positive predictive value of the test were 89, 95 and 98%, respectively. However, differences were encountered in the ratio of positive tests in relation to duration of the infection. Mab‐GSS dot immunobinding has also been applied, together with Mab co‐counterimmunoelec‐trophoresis on successive sera from 2 patients who recovered from clinically and mycologically proven episodes of systemic candidosis. It was demonstrated that both patients synthesized antibodies against glycoproteins sharing the 5B2 epitope, which was initially present transiently in their sera. Zusammenfassung. Der monoklonale Antikörper (MAK) 5B2, gerichtet gegen Zellwand‐Mannopro‐teine von Candida albicans, wurde gereinigt und an kolloidales Gold gekoppelt. Die Fähigkeit des gold‐konjugierten MAK, im Serum infizierter Organis‐men C. albicans‐Antigene nachzuweisen, wurde in einem Immunodot‐Ansatz mit Verstärkung durch Immun‐Silber‐Komplexierung (GSS) versucht. An Seren von 140 Meerschweinchen wurde eine Dop‐pelblindstudie durchgeführt, die 40 Kontrolltiere und 100 intravenös mit C. albicans infizierte Tiere umfaßte. Die Seren der infizierten Tiere wurden entweder 2 d (n= 4), 15 d (n= 9) oder 21 d (n=87) nach Inokulation gewonnen. Die Sensi‐tivität dieses Testes betrug 89 %, die Spezifität 95 % und der positive Vorhersagewert 98 %. Jedoch gab es Differenzen im positiven Testausfall in Abhän‐gigkeit von der Dauer der Infektion. Die MAK‐GSS Immunodot‐Reaktion wurde auch mit der MAK‐Kogegenstromelektrophorese an sequentiellen Seren zweier Patienten vergleichend angewendet, die klinisch und mykologisch belegte Episoden syste‐mischer Candidose durchgemacht hatten. Es konnte gezeigt werden, daß beide Patienten Antikörper gegen Glykoproteine bildeten, die das 5B2‐Epitop, das anfänglich vorübergehend in ihrem Serum nachzuweisen war, ebenfalls besaßen.